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蛋白质类选择剂的研究进展

来源: http://www.grain17.com/  类别:新闻中心  更新时间:2014-07-25  阅读

    蛋白质类手性选择剂因其具有特异的空间立体结构,对许多手性药物具有手性识别拆分能力,这对于生命科学和药物化学研究及人类的健康都具有十分重要的意义。 蛋白手性选择剂以添加方式应用于对映体拆分存在许多问题与不足,如强紫外背景吸收。为克服这些缺点,学者们进行了许多探索,如将蛋白固载在合适的基质上,这样不仅可以消除蛋白质强背景吸收对样品检测的干扰,而且还可以减少蛋白质的用量,这对较贵的蛋白质尤其重要。 因此,寻找相比面积大、表面易改性、易制备的基质成为蛋白手性固定相研究领域的一个重要方向。

    整体柱的出现,大大促进了蛋白固定化领域的发展,制备的蛋白亲和整体柱越来越多地应用于手性拆分,相信在手性拆分领域有着广泛的应用前景。虽然有机聚合物整体柱具有制备简单、结构均匀、重现性较好、柱效较高及可以进行快速分离等优点,并且在多种色谱模式下获得了成功应用。 然而,有机聚合物整体柱也存在着固有的缺点,如:机械强度相对较低,在有机溶剂作用下,床层会发生收缩或溶涨,导致柱性能发生变化,缩短柱寿命,并且其微孔结构不适宜小分子物质的分离和分析,柱容量低。

    硅胶整体柱则不存在上述缺点,因其特殊结构而显示出优越的性能。该柱同时具有大孔和中孔双孔结构,其中大孔相互连接形成多孔网络以保证流动相快速通过,同时保证较低的背压;整体柱骨架上的中孔保证了填料的比表面积,增大了柱容量。 这种整体柱的表面可以像传统的色谱填料一样进行衍生化处理,因此该类整体柱应用范围广,被用于酸性、碱性、中性以及容易和金属发生螯合作用的化合物的分离。 此外,由于硅胶整体柱机械强度高、稳定性好,保证了这种整体柱的重现性、可靠性和使用寿命。

    假固定相这一概念来源于胶束毛细管电动色谱,在胶束毛细管电动色谱中,存在着类似于色谱的两相,一相是流动的水相,另一相是类似固定相的胶束相, 胶束相与周围介质的电泳淌度不同,并且可以与溶质发生相互作用,在加压运行过程中不同的溶质分子在这两相之间的作用力的差异导致迁移速度不同而得到分离。 由此可见,胶束毛细管电动色谱与普通色谱的最主要区别是它的 “固定相”是移动的,这种移动的“固定相”又被称之为“假固定相”或“准固定相”。毛细管亲和电动色谱部分填充技术很好地利用这一原理,先往毛细管灌入一段蛋白质,形成一个蛋白区段即假固定相,并在此区域后引入所要研究的药物,在加压运行过程中,药物与蛋白因迁移速度不同,使药物穿过蛋白区域先到达检测窗口被检测。 中国粮油仪器在线  http://www.grain17.com/