凯氏定氮仪对刺槐花蛋白质等营养元素的测定
来源： http://www.grain17.com/ 类别：实用技术 更新时间：2015-03-31 阅读次
刺槐的嫩叶花在现代营养角度来说含有丰富的蛋白质、糖。和氨基酸、酶及多种微量元素。不再仅仅只有单纯的要用价值了。拥有这么多的营养价值，已然被放上了人们的餐桌了。因为蛋白质是人体三大营养素之一，是一切生命的物质基础，是构成人体新生组织、维持人体健康的重要成分。那么，刺槐花的蛋白质含量如何检测呢？主要的检测仪器当然还是凯氏定氮仪。
凯氏定氮仪测定蛋白质的主要原理是，蛋白质是含氮的有机化合物。刺槐花中含氮的有机化合物与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以盐酸标准溶液滴定，酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
凯氏定氮仪具体的操作细节如下：
精密称取样品2.0g于500mL干燥的凯氏定氮瓶中，加入硫酸钾6.0g、硫酸铜0.2g以及浓硫酸20mL，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶内液体微沸。随时转动烧瓶，使瓶壁上的内容物全部流入消化液中，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热约40min，取下放冷，加入20mL蒸馏水，移入100mL容量瓶中，用蒸馏水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，摇匀备用。取与处理样品相同量的硫酸钾、硫酸铜、浓硫酸按同一方法做空白对照试验。
装好定氮蒸馏装置，于水蒸气发生瓶内装水约2/3处，加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入数粒玻璃珠以防暴沸，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的锥形瓶内，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL样品消化液由小玻璃杯流入凯氏蒸馏器内，并以10mL水洗涤小玻璃杯，使流入反应器内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。再将10mL40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，立即将玻璃盖塞紧，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧夹子，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管进入接收瓶内。从第一滴蒸馏液滴下起计时，蒸馏5min后，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面再蒸馏1min，使氨全部蒸出，可用精密pH试纸测冷凝管口的冷凝液来测定蒸馏是否完毕，中性则说明已蒸馏完全。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同时吸取10.0mL试剂空白消化液按上述方法操作。
通过凯氏定氮仪对刺槐花蛋白质含量的检测，更让我们对刺槐花的营养价值得到进一步的验证，也不在有任何不信任的感觉。
凯氏定氮仪测定蛋白质的主要原理是，蛋白质是含氮的有机化合物。刺槐花中含氮的有机化合物与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以盐酸标准溶液滴定，酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
凯氏定氮仪具体的操作细节如下：
精密称取样品2.0g于500mL干燥的凯氏定氮瓶中，加入硫酸钾6.0g、硫酸铜0.2g以及浓硫酸20mL，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶内液体微沸。随时转动烧瓶，使瓶壁上的内容物全部流入消化液中，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热约40min，取下放冷，加入20mL蒸馏水，移入100mL容量瓶中，用蒸馏水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，摇匀备用。取与处理样品相同量的硫酸钾、硫酸铜、浓硫酸按同一方法做空白对照试验。
装好定氮蒸馏装置，于水蒸气发生瓶内装水约2/3处，加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入数粒玻璃珠以防暴沸，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的锥形瓶内，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL样品消化液由小玻璃杯流入凯氏蒸馏器内，并以10mL水洗涤小玻璃杯，使流入反应器内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。再将10mL40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，立即将玻璃盖塞紧，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧夹子，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管进入接收瓶内。从第一滴蒸馏液滴下起计时，蒸馏5min后，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面再蒸馏1min，使氨全部蒸出，可用精密pH试纸测冷凝管口的冷凝液来测定蒸馏是否完毕，中性则说明已蒸馏完全。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同时吸取10.0mL试剂空白消化液按上述方法操作。
通过凯氏定氮仪对刺槐花蛋白质含量的检测，更让我们对刺槐花的营养价值得到进一步的验证，也不在有任何不信任的感觉。
