概况：以留胚米Z601为原料，利用发芽过程使精米中γ一氨基丁酸积累。通过单因素实验、响应面实验得到了精米中GABA含量与浸泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间4 种发芽条件回归模型，确定了对GABA含量积累最有利的发芽工艺条件为浸泡温度31 'c、浸泡时间、发芽温度31 'c、发芽时间27h ，此条件下精米中GABA 含量为3 1.1 3mgl10饨，是不发芽条件下的4倍。

　　目前，水稻中GABA含量的研究主要原料是糙米，糙米的口感影响人们的消费。Z601是一种高胚率的米，其精米留肝率在80%以上。本研究以Z601 为原料，通过精米机等仪器进行实验，响应面实验研究精米中GABA 含量与漫泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间4 种发芽条件的关系，为留胚精米的综合利用和新产品的开发提供理论参考。

　　材料与仪器

　　材料

　　留胚米Z601  国家梗稻工程技术中心；γ- 氨基丁酸 Sigma-Aldrich CoLLC；三氯乙酸、次氯酸钠、醋酸钠。天津市北方天医化学试剂厂；甲醇(色i谱纯)、乙睛(色谱纯)  Merck KGaA Darmstadt Germany；硫基乙醇 AMRESCO Inc；邻苯二甲醛 生工生物(上海)工程有限公司。

　　仪器

　　高效液相色谱仪LC- lO ATVP：日本岛津公司 Venusil MP-C" 色谱柱(4.6mm x 250mm) ；

　　TE214S 电子天平：赛多利科学仪器有限公司；

　　LTJM-2099精米机：杭州麦哲仪器有限公司；

　　;pHS-3C型pH计：天津盛邦科学仪器技术有限公司；

　　HYG恒温摇床：上海欣蕊自动化设备有限公司；

　　HK-02A粉碎机：广州旭朗机械设备有限公司；

　　SI-fB-3 型循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸有限公司；

　　针式过滤器：天津博纳艾杰尔科技有限公司；

　　一次性使用无菌注射器( lmL)：上海治宁医疗器械有限公司。

　　实验方法

　　1.2.1 精米发芽工艺条件及操作要点工艺流程:原

　　料筛选→去皮成糙米→磨成精米→泊'毒→清洗→发芽→干燥→粉碎。

　　操作要点:选取籽粒饱满的稻米，去皮后用LTJM-2099精米机处理40s成为精米。为了抑制发芽后的发酵昧，用1%的次氯酸铀水榕液洗lmin，用灭菌的去离子水反复冲洗3遍。将处理好的精米用纱布包好，恒温浸泡，转入培养皿中发芽，保持培养温润，每到上下翻动一次。发芽结束后将培养且放入55CC烘箱终止活性，干燥一定时间，取出粉碎。

　　1.2.2 GABA含量测定

　　样品准备:将粉碎后的样品过60目筛，称取2g加入5%三氯乙酸水榕液5mL，30℃振荡提取2h，离心(转速10000r/min)lOmin，取上清液待测。

　　色谱条件:单泵，流速为0.9mL/min; 色谱柱为Venusil MP-C" (4.6 x 250mm) ，柱温30 "C ;流动相为1.6g NaAc .3H2O榕于600mL水中，pH7.2 甲醇200mL，乙氧200mL；检测波长338nm。

　　衍生化；吸取棚酸缓冲液(O.4mol/L，pH10.4)1000μL，样品200μL，OPA 衍生试剂(OPA 80mg，β- 琉基乙醇80μL ，乙睛10mL) 200μL ，泪合均匀，暗室中室温反应5min后进样20μL。

　　GABA标准曲线的绘制：用配制好的250mg/L的标准液分别稀释50、40、30、20、10、6、5倍，柱前衍生，吸取20μL进样，重复三次，以GABA的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。